[摘要] 目的 探讨隐丹参酮对乳腺癌MDA-MB-231細胞迁移、侵袭的影响及其机制。 方法 用不同浓度的隐丹参酮处理 MDA-MB-231 细胞24 h。采用 MTT、划痕实验和Transwell侵袭实验测定不同浓度隐丹参酮对MDA-MB-231细胞活性、迁移和侵袭的影响。采用Western blot检测MDA-MB-231细胞中c-Src、p-c-Src Tyr416、FAK、p-FAK Tyr576/577、MMP2蛋白表达水平。 结果 与0 μmol/L对照组相比，5 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L、40 μmol/L隐丹参酮组对 MDA-MB-231 细胞存活率显著降低，且呈剂量依赖（P<0.05）。与对照组相比，5 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L隐丹参酮组对MDA-MB-231 细胞迁移、侵袭率均显著降低，且呈剂量依赖（P<0.05）。Western blot结果显示，与对照组相比，不同浓度组经隐丹参酮处理的 MDA-MB-231 细胞，MMP2蛋白水平和 c-Src、FAK蛋白的磷酸化水平均显著下调（P<0.05）。 结论 隐丹参酮可抑制三阴乳腺癌MDA-MB-231 细胞活性、迁移和侵袭，其机制可能与其下调c-Src/FAK通路和MMP2表达有关。
[关键词] 隐丹参酮；乳腺癌；MDA-MB-231细胞；迁移；侵袭
[中图分类号] R273 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2017）35-0016-05
[Abstract] Objective To investigate the effects and molecular mechanism of Cryptotanshinone on migration and invasion of breast cancer MDA-MB-231 cells. Methods MDA-MB-231 cells were treated with different concentrations of Cryptotanshinone for 24 h. The effects of Cryptotanshinone on cell viability， migration and invasion of breast cancer MDA-MB-231 cells were assessed by MTT assay， wound healing assay and Transwell invasion assay. The protein levels of c-Src， p-c-Src Tyr416， FAK， p-FAK Tyr576/577， MMP2 were detected by Western blot. Results The results showed that 5 μmol/L， 10 μmol/L， 20 μmol/L， 40 μmol/L Cryptotanshinone groups significantly reduced the viability ability of MDA-MB-231 cells in a dose-dependent manner， compared with the control group（P<0.05）. 5 μmol/L， 10 μmol/L， 20 μmol/L Cryptotanshinone groups significantly inhibited the the abilities of migration and invasion of MDA-MB-231 cells in a dose-dependent manner， compared with the control group（P<0.05）. The result of Western blot showed that Cryptotanshinone inhibited the expression of MMP2 and the phosphorylation of c-Src、FAK in a dose-dependent manner in MDA-MB-231 cells（P<0.05）. Conclusion These results suggest that Cryptotanshinone may suppress the viability， migration and invasion of breast cancer MDA-MB-231 cells by inhibiting c-Src/FAK pathway and the expression of MMP2.
[Key words] Cryptotanshinone； Breast cancer； MDA-MB-231 cells； Migration； Invasion
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率逐年增加，目前居女性癌死亡率的第一位[1]。其中，全世界每年约1000 000乳腺癌新增病例中超过17%的患者为三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）[1-2]。三阴性乳腺癌是指雌激素受体（estrogen receptor，ER）、孕激素受体（progesterone receptor，PR）与人类表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor- 2，Her-2）均为阴性的一类乳腺癌[1-3]。由于其恶性程度和侵袭性高，易在短期内复发转移，且其对雌、孕激素受体表达阳性和Her-2过表达的乳腺癌的靶向治疗不敏感，因此生存率比非三阴性乳腺癌差[2-3]。目前，三阴性乳腺癌治疗方法研究成为国际上乳腺癌研究的热点之一[1-3]。隐丹参酮（cryptotanshinone）是从唇形科植物丹参根中提取分离的二萜醌类有效单体，具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物学活性和药理效应[4-5]。近来文献报道，隐丹参酮具有抑制乳腺癌细胞增殖、迁移等作用，然而有关隐丹参酮对乳腺癌细胞迁移和侵袭的作用及其机制目前尚不完全清楚[6]。本研究以三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞为研究对象，用不同浓度隐丹参酮干预，检测其活性、迁移和侵袭能力，检测迁移、侵袭相关分子基质金属蛋白酶 2（matrix metalloproteinase 2，MMP2）表达水平和c-Src 激酶、黏着斑激酶（focal adhesion kinase，FAK）磷酸化水平，从而观察隐丹参酮对MDA-MB-231细胞迁移和侵袭的影响，并初步探讨其机制，现报道如下。