[摘要]目的探讨血浆白三烯_B4（LT_B4）、MMP_9的水平与颈动脉不稳定斑块的关系。方法根据超声将352例颈动脉斑块的患者，稳定斑块组（127例）和不稳定斑块组（225例），无颈动脉斑块患者125例为对照组。应用ELISA法测定患者外周血浆LT_B4、基质金属蛋白酶_9（MMP_9）。结果颈动脉斑块组患者血清LT_B4、MMP_9水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；不稳定斑块组患者血清LT_B4、MMP_9浓度水平均高于稳定斑块组，差异有统计学意义（P<0.01）；LT_B4水平升高是颈动脉不稳定斑块的危险因素（OR=2.104，95%CI：1.526～3.015）。结论血清白三烯B4、MMP_9与不稳定的颈动脉斑块有关。
[关键词]颈动脉斑块；白三烯B4；MMP_9
中图分类号：R543.4文献标识码：A文章编号：1009_816X（2013）03_0190_03
动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）目前被公认为是一种慢性炎症性疾病[1]，动脉粥样斑块（CAP）在体内各种炎性细胞的参与下发生、生长、破裂、血栓形成、最终堵塞动脉构成一系列心脑血管性疾病。研究证实约1/4的脑卒中归因于颈内动脉颈段狭窄和闭塞引起的缺血性事件[2]。白三烯（leukotrienes，LTs）在动脉粥样硬化炎症中扮演着重要的角色[3]。早期的研究已经表明白三烯B4（LTB4）通过上调斑块内基质金属蛋白酶（MMPs）表达，刺激斑块内基质金属蛋白酶分解细胞外基质，导致动脉粥样斑块的发展进而造成斑块的不稳定、甚至破裂[4]。本文旨在探讨LT_B4、基质金属蛋白酶_9（MMP_9）与颈动脉粥样斑块稳定性之间的相关性。
1资料与方法
1.1一般资料：选择2008年5月至2012年6月本院神经内科住院诊断为颈动脉粥样斑块患者352例，男218例，女134例，年龄35～75（61.42±14.75）岁，同期与本院神经内科住院的年龄匹配的无颈动脉粥样斑块患者125例为对照组，男79例，女46例，年龄35～75（62.15±14.13）岁。排除标准：（1）有支气管哮喘、慢性阻塞性肺病患者；（2）严重心、肺、肝、肾功能不全；（3）血液病或肿瘤；（4）过敏性及自身免疫性疾病；（5）严重慢性感染者；（6）患者及家属不能配合。该研究经本院医学伦理委员会批准。
1.2方法：
1.2.1临床资料采集：统一记录入选对象的年龄、性别、吸烟史、既往慢性病史：如高血压史、冠心病史、糖尿病史、家族史等临床基本资料。
1.2.2颈动脉粥样硬化斑块的检测方法及斑块稳定性诊断[5]：采用美国GE公司LOGIQ7彩色超声诊断仪，探头频率10MHz线阵探头，均由2位超声科专业医师操作。受检者取仰卧位，双肩垫枕，暴露颈部，头转向对侧，从锁骨内侧端开始，分别检测双侧颈总动脉（CCA）主干、颈总动脉分叉处（BIF）、颈内动脉（ICA）及颈外动脉（ECA）。测量并记录颈动脉内膜中层厚度（IMT）、管壁内径，粥样硬化斑块的大小、数目及回声强度等。颈动脉粥样硬化斑块的诊断标准：（1）IMT>1.2mm为斑块形成，颈动脉内膜光滑完整者正常；（2）根据斑块的形态、性质及超声下表现可以将斑块分为四型：①扁平斑：厚度小于2mm，中等以上强度回声，内膜不光滑，增厚，局部隆起或呈偏心性增厚；②软斑和混合斑：斑块厚度大于2mm，呈均匀的弱回声或呈多个低回声及强回声混杂；③硬斑：斑块形态不规则，高低不平，强回声表现，后伴声影伴有声衰减；④溃疡斑：斑块呈溃疡状表现，斑块较大，基底较宽，表面不平坦，超声显示为“火山口”状。根据超声检测结果，将颈动脉斑块患者分为稳定性斑块组（SCP），包括扁平斑、硬斑。不稳定性斑块组（UCP）包括软斑和混合斑、溃疡斑。
1.2.3标本的采集与检测：血液标本采集于入院后第2日清晨空腹抽取肘静脉血，检测肝肾功能、凝血功能、血脂、超敏C反应蛋白（hsCRP）、同型半胱氨酸等生化指标。LT_B4、MMP_9检测：静脉血约5ml置入促凝管，分离上清后置负-70℃冰箱保存，统一集中检测。采用ELISA法测定LTB4、MMP_9，两种试剂盒均由购自美国R&DSYSTEM公司，由一名检验科专业人员严格按照操作说明步骤进行。
1.3统计学处理：运用SPSS11.5版软件包进行统计学分析。计量资料采用（x-±s）表示，用独立样本t检验，若不符合正态分布的计量资料，采用对数转换符合正态分布后再使用t检验。计数资料采用卡方检验。采用Logistic回归分析确定影响颈动脉斑块稳定性的危险因素。将颈动脉斑块稳定性（Y1）（稳定=0，不稳定=1）为因变量，将老年（X1）（<60岁=0，60岁=1），高血压病（X2）（无=0，有=1），糖尿病（X3）（无=0，有=1），吸烟（X4）（无=0，有=1），LDL水平（X5）（正常=0，偏高=1），LTB4水平（X6）（≤85.13ng/L=0，>85.13ng/L=1），hsCRP水平（X7）（≤1.35mg/L=0，>1.35mg/L=1）为自变量。P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1颈动脉斑块患者与非颈动脉斑块患者炎症因子水平比较：颈动脉斑块组血清LTB4、MMP_9、hsCRP均高于无动脉斑块的对照组，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01），见表1，但是进一步在颈动脉斑块的亚组血清LT_B4及MMP_9在不稳定斑块中的表达高于稳定斑块组，hsCRP在溃疡斑组中的表达高于稳定组及软斑和混合斑组，见表2。
表1颈动脉斑块患者与对照组患者血清炎症因子水平比较（x-±s）
组别nLTB4（ng/L）MMP_9（ng/ml）hsCRP（mg/L）颈动脉斑块组352218.88+55.74*189.25+35.26*1.36+0.81**对照组12581.58+56.3187.19+12.710.91+0.54注：与对照组比较*P<0.05，**P<0.01表2颈动脉斑块患者中各项炎症因子水平比较（x-±s）
组别nLTB4（ng/L）MMP_9（ng/ml）hsCRP（mg/L）稳定斑块组12785.13±55.79*81.67±29.81*1.35±0.56不稳定性斑块组225293.91±55.71248.92±30.341.37±1.16注：与不稳定斑块组比较*P<0.05，**P<0.012.2血清LTB4水平与颈动脉斑块发生及稳定性的相关性：非条件Logistic回归分析显示除吸烟、糖尿病和LDL水平等传统颈动脉斑块易患因素外，异常升高的血清LTB4水平与不稳定颈动脉斑块的发病风险存在相关性（P<0.01），见表3。表3颈动脉斑块稳定性的Logistic回归分析
项目βSEWaldX2POR95%可信区间吸烟0.360.164.59<0.051.431.04～1.73糖尿病0.490.224.98<0.051.721.09～2.14LDL_C0.020.014.79<0.051.691.08～2.12LTB42.160.807.86<0.012.101.53～3.023讨论
近年来的研究表明，白三烯在动脉粥样硬化性损伤中作为信号分子在动脉粥样硬化中扮演了重要角色[6]，既往的研究证实LTB4的升高被认为是急性冠脉综合征、心肌梗死的一个重要危险因素[7]。早期的研究已经表明白三烯参与动脉粥样硬化形成与进展主要通为过度上调MMPs的表达，MMP_9为诸多基质金属蛋白酶因子中的最重要一种通过降解血管基底膜及斑块纤维帽的主要成分，破坏血管基底膜及斑块纤维帽，造成血管基底膜的通透性增高、渗出增加刺激粥样斑块的不断发展并同时造成斑块纤维帽破裂最终形成斑块溃疡[8]。Sánchez_Galán等[9]发现颈动脉粥样硬化患者的白三烯_B4受体mRNA的表达较对照组均明显增高，同时血浆白三烯_B4水平也明显升高；免疫组化分析发现颈动脉斑块的炎症区白三烯_B4受体的表达较纤维帽更显著。这些结果说明了LTB4在斑块炎症反应和促进动脉粥样硬化斑块的不稳定性过程中起着重要作用。本文结果表明随着颈动脉斑块的从无到有，从稳定性斑块到不稳定性斑块直至溃疡斑，血浆中LTB4水平随着斑块的恶化程度不断升高，LTB4水平与颈动脉粥样斑块的发生、发展呈正相关，并且有实验研究表明白三烯受体拮抗剂能够对不稳定型斑块有明显的抑制作用[10]。
本文结果表明LTB4能够在早期的稳定的颈动脉粥样斑块或部分不稳定粥样斑块患者中测值较hsCRP更具敏感性，从而能够更早地进行干预。
综上所述，该研究结果显示：LTB4及其相关的基质金属蛋白酶MM_9水平升高与颈动脉粥样斑块的不稳定性存在相关性，对反映颈动脉粥样斑块的病情严重程度具有一定的提示。虽然本文表明LTB4与颈动脉斑块之间存在关联性，但只是一个横断面研究，不能明确LTB4是否是颈动脉不稳定型粥样斑块的独立危险因素，需要进一步前瞻性的队列研究。
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（收稿日期：2013_1_2）