打开文本图片集
【摘要】 目的：探讨雌激素受体拮抗剂对泌乳素腺瘤细胞增殖的影响。方法：在同样去激素培养的条件下添加不同浓度雌激素和雌激素受体拮抗剂，应用MTT法检测其对GH3细胞增殖的影响。结果：不同浓度的OHTam对GH3细胞有明显的抑制作用，并且与剂量呈正相关，10-11 mol/L即有抑制作用，10-6 mol/L抑制作用达到最大。E2可显著的刺激GH3细胞增殖，10-12 mol/L即有促进增殖作用，10-9 mol/L作用达到最大，而后随着浓度的升高增殖作用反而逐渐减弱。结论：雌激素受体拮抗剂能显著抑制泌乳素腺瘤细胞的生长，理论上可以用于泌乳素腺瘤的药物治疗。
【关键词】 泌乳素腺瘤; 雌激素; 雌激素受体拮抗剂; GH3细胞
【Abstract】 Objective：To investigate the effect of estrogen receptor antagonists on the in vitro growth of human prolactinomas.Method：Estradiol and estrogen receptor antagonists were added respectively at different concentrations into the culture medium MTT assays were used to detect the effects on the growth and proliferation of GH3 cells.Result：OHTam could inhibit GH3 cell proliferation as dose-dependent manner，when the concentration was 10-11 mol/L，the GH3 cell proliferation was inhibit.If the concentration rises to 10-6 mol/L，it would produce the greatest effect.E2 had significant stimulatory effect on growth of GH3 cells，and the effect worked even at low concentration of 10-12 mol/L.The greatest effect would produce when the concentration was 10-9 mol/L，if the concentration still increases，the proliferation effect would gradually weaken.Conclusion：Estrogen receptor antagonists can inhibit GH3 cell proliferation.In theory，it can be used for the drug treatment of prolactinomas.
【Key words】 Prolactinomas; Estradiol; Estrogen receptor antagonists; GH3 cells
First-author’s address：Zhongshan People’s Hospital，Zhongshan 528400，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.10.007
泌乳素（Prolactin，PRL）腺瘤是垂体腺瘤中最常见的类型，占所有垂体腺瘤中的40%～60%，其临床表现主要有泌乳、闭经、不孕、头痛、视力障碍、垂体功能低下等。在多巴胺受体激动剂出现之前，临床上治疗方法主要为手术治疗及放射治疗。随着以溴隐亭为代表的多巴胺受体激动剂的发现，多巴胺受体激动剂现已成為泌乳素腺瘤的首选治疗方案。但目前临床上仍有5%～18%泌乳素腺瘤患者对多巴胺受体激动剂耐药，主要发生在大腺瘤当中。临床上将这类肿瘤称为耐多巴胺受体激动剂性泌乳素腺瘤（Dopamine agonist-resistant prolactinomas，DARPs）。目前对于泌乳素腺瘤耐药性的具体机制研究较多，但仍不是十分明确。临床上发现服用大剂量的雌激素可以增加泌乳素腺瘤的发病率，在雌激素治疗过程中泌乳素微腺瘤可发展为大腺瘤。因而雌激素在泌乳素腺瘤发展过程中可能起到了重要作用。也有学者认为给予雌激素受体拮抗剂可以增加DARPs对多巴胺受体激动剂的敏感性，从而提高药物治疗的有效性。目前研究已发现，PRL腺瘤细胞表面存在雌激素受体（estrogen receptor，ER），其与肿瘤细胞的增殖和生物学特性有着密切的关系。本实验将通过在同样培养条件下，了解不同浓度雌激素、雌激素受体拮抗剂对大鼠GH3 垂体腺瘤细胞增殖的影响，现报道如下。
1 材料与方法
1 材料
1.1 实验药物和瘤细胞系 本实验采用的雌激素为雌二醇（estradiol，E2），雌激素受体拮抗剂为4-羟基他莫昔芬（4-hydroxytamoxifen，OHTam），药物的浓度梯度为10-6、10-7、10-8、10-9、10-10、10-11、10-12 mol/L，药物使用无水乙醇溶解，乙醇终浓度小于0.1%。实验采用的PRL腺瘤细胞为GH3大鼠垂体腺瘤细胞株。
1.2 去激素小牛血清的制备 在新生小牛血清中加入人葡聚糖（0.25 g/L），完全溶解后加入活性炭（2.5 g/L），于55 ℃水浴中作用45 min，离心10 min，取其上清液。上述步骤连续处理2次以彻底去除血清中的雌激素。处理好的血清使用金属滤器（0.45、0.22 μm两层滤膜）过滤除菌，然后置入-20 ℃保存。