【摘要】宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一。高危型人乳头瘤病毒（human papillomavirus， HPV）持续感染是子宫颈癌及其癌前病变的必要因素。而HPV筛查对宫颈癌前病变及宫颈癌的早期诊断、正确处理、有效预防及预测病变进展具有重要的意义。目前已有多种HPV检测技术，但因其检测原理，对病变的检出率以及它的优缺点不同，在子宫颈癌筛查中还需合理的应用。
【关键词】 人乳头瘤病毒； 宫颈癌； 筛查
[Abstract] Cervical cancer is one of the most common gynecologic malignant tumor. Human papillomavirus is the main pathogenic factor of cervical cancer and precancerous lesions. And HPV detection has the vital significance for early diagnosis， correct treatment of cervical lesions and effective prevention and forecast lesion progress. There are many HPV detection methods，for different detection principles， lesion detective rates and different advantages and disadvantages ，they require reasonable applicationin the practical application.
[Key words] Human papillomavirus； Cervical cancer； Screening
子宫颈癌是妇科最常见的全球第四大恶性肿瘤。据统计，全球每年约有52.8万的新发子宫颈癌病例，其中70%发生在发展水平较低国家，中国每年近12.96万新发病例，约占世界新发病例总数的1/5[1]。
经长时间研究发现，人乳头瘤病毒（HPV）持续感染是诱发子宫颈癌及癌前病变的主要原因。目前已发现有200余种型别的HPV病毒。根据其导致宫颈癌发生的危险性，分为发生于外生殖器疣的HPV和宫颈良性病变的低危型HPV两种，在导致子宫颈癌的HPV型别中，以HPV16和18型为主。大量研究结果显示，大多数妇女一生都会感染HPV，但有90%以上的人会在两年内自动清除，且从HPV感染到发展为子宫颈癌需要10～20年的时间。由于宫颈细胞涂片的广泛应用及大面积普查，宫颈癌的发病率及死亡率均有明显下降，但是对于大量的已感人群而言，通过筛查进行宫颈癌的预防和控制是不可或缺的。最新的世界卫生组织（WHO）指南推荐用HPV检测做初筛。本文就几种已通过FDA批准的HPV检测方法的研究原理以及优缺点，对病变的检出率等作一综述。
1第二代杂交捕获试验（Hybrid Capture2，HC2）
HC2是目前广泛应用的子宫颈癌筛查和随诊的方法。HC2检测原理：利用基因杂交、化学发光、信号放大的原理，一次可检测13种高危型HPV型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68型）的定性及半定量检测技术。HC2优点：以基因全长为探针无需基因扩增，无需提取DNA，操作简便、效率高且标准化，适于大量人群筛查，具有较高的临床敏感度，仪器判读结果，可避免人为错误，检测结果可靠准确。有大量研究显示HC2对子宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）2+和CIN3+病变有很高的灵敏度。基于这些优点，该方法已经得到世界范围的认可。其缺点在于对检测设备要求高，试剂检测费用较贵，一次检
测需人民币350多元，每次检测需要6～7小时才能完成，时间较长，且不能对HPV某一特定型别进行检测，存在交叉杂交引起的假阳性，使特异性降低[2]，以及所测得的病毒量也完
全取决于采集标本时所收集到的细胞量，并不能准确反映患者所携带的病毒量。因HC2费用昂贵，仅适合我国的部分大中城市。
2HPV快速筛查技术（careHPV）
careHPV检测是基于HPVDNA检测二代杂交捕获技术，并引入磁珠捕获方法，采用专利全长8000个碱基对的RNA混合鸡尾酒探针，利用核酸杂交和信号放大及化学发光方法，对14种高危HPV型（16、18、31、33、35、39 、45、51、52、56、58、59、66和68）的病毒进行检测，是一种操作简单、经济、快捷的筛查技术。其优点在于对实验室条件要求低；对水电设备无特殊要求；对实验员的要求低，无任何相关工作经验的人员也只需几小时的培训即可操作；检测时间相对要短，只需2.5小时即可完成；在极其严苛的环境条件下，此检测方法也能够避免样品的交叉污染，可降低假阳性率；检测价格低于5美元等多个优点。有研究结果显示，careHPV检测检出CIN2+的灵敏度为90.9%，特异度为82.0%，阳性预测值41.7%，阴性预测值98.5%，虽然阳性预测值和阴性预测值低，但检测结果与HC2检测结果一致率分别达到92.6%和90.3%[3]。其缺点在于特异度较低，在筛查中假阳性率高而致阴道镜转诊率高，需进一步分流检测。但在经济欠发达地区仍可应用，从而尽可能地降低宫颈癌的发病率和死亡率，进而保障经济欠发达地区妇女的生活质量。
3CervistaTM HPV检测
CervistaTM HPV采用一种用于检测特定核苷酸序列的信号放大方法进行14种高危型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68和66型）病毒的检测方法。其有两种诊断方法：一种是可同时检测14种高危型的HPV类型（CervistaTM HPV HR），与HC2检测法相同，此方法不能对某一型别的HPV进行分型检测；另一种方法（CervistaTM HPV16/18）用于检测HPVl6和18型并进行分型。在我国，2007年针对我国妇女人群HPV型别分布的结果表明在子宫颈癌中HPV16、18、58、52最常见，而HPV16/18的联合感染率达到69.6%[4]。因此采用CervistaTM HPV16/18检测方法能对高危感染的HPV进行分型检测，能早期筛出子宫颈病变，从而能够早期诊断、正确处理，有效预防病变的进展，减少宫颈癌的发病率及死亡率。其优点在于灵敏度高、阴性预测值高及交叉反应少，在临床上与子宫颈细胞学检查联合进行宫颈病变的筛查，能够降低单一细胞学检查假阴性结果的出现，减少漏诊。其缺点在于技术费用昂贵且较为复杂，检测设备要求高，在经济欠发达地区很难大规模采用。
4cobas 4800 HPV检测
cobas 4800 HPV检测技术采用了x480全自动样品制备仪及z480全自动实时聚合酶链反应（PCR）扩增和检测技术，一次检测14种高危型HPV型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68型），与HC2检测相比增加了HPV66型的检测，而且能鉴别高危型HPV16和HPV18。cobas 4800 HPV检测采用PCR的高灵敏性以及导流杂交技术的高特异性，并通过多重定性的检测方法提高了HPV检测和分型的准确性。而能够对HPVl6和18型进行分型检测，能够提高筛查的针对性以及对病变的随访，及时发现高危病变并治疗，从而可有效地降低宫颈癌的发生率及死亡率。cobas 4800 HPV检测对CIN2+检测结果更为灵敏，有研究表明对CIN2及CIN3患者cobas4800 HPV和HC2检测结果敏感度均为97.92%，一致率达到95.83%，全部受检者中，两种检测方法的一致率为93.11%[5]。崔晓莉等[6]的研究显示，细胞学假阴性病例中，HC2和cobas 4800 HPV检测的阳性检出率均为100%。cobas 4800 HPV检测的优点有：全自动样品制备，自动化高质量核酸提取；检测需4个多小时出结果，受检者很快得知结果；双向LIS连接自动化结果报告，减少劳动力和潜在的错误；促进实验室效率，8小时能够检测288个样本；各级实验室的人员只需几小时的培训就能掌握；准确、可靠及重复性少等多个优点。其缺点在于对检测仪器设备的要求，检测费用昂贵，一次检测需要250元人民币左右，并且由于该检测技术在国内批准应用的时间较晚，目前临床应用不是很普遍，在很多地区目前没有开展应用此方法进行筛查。
综上所述，几种HPV检测方法均有各自的优缺点。对已感染的人群采取哪种筛查方法，进行有效的预防病变以及随访、治疗是目前面临的问题。虽然HPV定性检测与分型检测相整合或覆盖多个型别的HPV分型检测成为了HPV检测方法的一种发展趋势，但在我国经济水平欠发达，宫颈癌高发地区如何有效的应用HPV检测法进行筛查以及应对不同经济发达地区应选何种检测方法进行筛查是目前面临的主要问题，还需进行更多的临床研究。
参考文献
[1] 赫捷，陈万青.2012中国肿瘤登记年报[M].北京：军事医学科学出版社，2012.
[2] 宋晓霞，孔令非.人乳头状瘤病毒分子生物学检测方法研究进展[J].中华实用诊断与治疗杂志，2012，05：419420.
[3] 张荣，赵方辉，陈汶，等.careHPV～（TM）筛查宫颈癌及癌前病变的有效性和可靠性评价研究[J].癌症进展，2012，05：506510.
[4] 马会，舒丽莎.Cervista HPV HR检测在宫颈病变筛查中的研究进展[J].中国妇幼保健，2014，04：641644.
[5] 马庆，张瑾.Cobas 4800 HPV检测对宫颈癌筛查的运用分析[J].中国性科学，2014，01：2527.
[6] 崔晓莉，王纯雁，王红，等.cobas 4800 HPV检测在宫颈癌筛查中的应用价值[J].中国肿瘤临床，2013，（06）：341344.